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淺析數(shù)字PCR儀的應(yīng)用領(lǐng)域

更新時(shí)間:2024-11-29瀏覽:1287次
  數(shù)字pcr儀用于運(yùn)行病毒檢測(cè)實(shí)驗(yàn),并對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析;儀器既可在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)操作,又可用于野外科學(xué)實(shí)驗(yàn),配合相應(yīng)試劑,對(duì)取自待檢測(cè)樣本的分析物或其他分析物中的目標(biāo)核酸進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的定性檢測(cè)。
  應(yīng)用領(lǐng)域:
  1.基因表達(dá)
  通常可通過(guò)數(shù)字pcr儀來(lái)檢測(cè)不同細(xì)胞類型、組織和生物體在特定時(shí)間點(diǎn)的基因表達(dá)差異。首先,從目標(biāo)樣品中分離出RNA并將mRNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。隨后,通過(guò)由PCR擴(kuò)增的cDNA數(shù)量,確定mRNA的初始水平。這一過(guò)程也被稱為逆轉(zhuǎn)錄PCR,RT-PCR。
  2.基因分型
  數(shù)字pcr儀可用于檢測(cè)特定細(xì)胞或生物體中等位基因的序列差異。例如,基因敲除和敲入小鼠等轉(zhuǎn)基因生物的基因分型。引物對(duì)經(jīng)設(shè)計(jì)位于目標(biāo)區(qū)域側(cè)翼,可根據(jù)是否存在擴(kuò)增子及擴(kuò)增子長(zhǎng)度來(lái)檢測(cè)遺傳變異。
  3.分子克隆
  PCR被廣泛應(yīng)用于目標(biāo)DNA片段的克隆,該技術(shù)被稱為PCR克隆。在直接PCR克隆中,DNA(如,gDNA、cDNA、質(zhì)粒DNA)的目標(biāo)區(qū)域被擴(kuò)增并插入到特殊設(shè)計(jì)的兼容載體中。
  4.醫(yī)學(xué)、法醫(yī)學(xué)和應(yīng)用科學(xué)
  數(shù)字pcr儀技術(shù)不僅可用于基礎(chǔ)研究,還適用于日常的臨床診斷、法醫(yī)學(xué)調(diào)查和農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究。這些應(yīng)用要求可靠的性能、靈敏度和嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)。因此,所使用的數(shù)字pcr儀和PCR試劑必須符合這些要求和目的。

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